島津LC-20A液相色譜儀自檢出現錯誤原因分析
故障1:自檢時,出現“燈能量低”的錯誤
原因分析:
一般來說是由于系統中有擋光物,光路偏離,氘燈電源系統或氘燈燈泡已壞。
解決方法:
首先要檢查光度室是否有擋光物;打開檢測器光源室蓋,檢查氘燈是否點亮,如果氘燈不亮,則關機,更換新氘燈,換氘燈時,需注意型號;檢查氘燈保險絲,看是否松動、氧化、燒斷,如果氘燈保險絲出現故障,應立即更換;再開機重新自檢,若仍出現上述故障,則重新安裝軟件后再進行自檢。
故障2:出峰不準,峰分叉
原因分析:
造成這種情況的原因一般是色譜柱被污染,或柱頭填料塌陷。
解決方法:
對于第1種情況,先用純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),再換成甲醇沖洗,然后,再用純水沖洗,最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30min以上。
對于第2種情況,擰開柱頭,檢查柱填料是否硬結或塌陷,去除硬結部分(污染的填料),裝入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填平,用與內徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊,再填平,滴甲醇,再壓緊反復幾次,直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈,擦凈柱外壁的填料,擰緊柱頭,用純甲醇沖洗30min以上。
故障3:流動相內有氣泡
原因分析:
流動相內不斷有氣泡溢出,關閉泵,打開排空閥,按PURGE鍵清洗脫氣,氣泡不斷的從過濾器冒出,進入流動相,無論打開PURGE鍵幾次,都無法清除不斷產生的氣泡。主要是因為過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內,過濾器內部由于霉菌的生長繁殖,形成菌團,阻塞了過濾器,緩沖液難以流暢地通過過濾器,空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。
解決方法:
過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,超聲清洗15min即可;亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36h,輕輕震蕩幾次,再將過濾器用純水清洗幾次,打開泄壓閥,打開PURGE鍵清洗脫氣,如仍有氣泡不斷從過濾器冒出,繼續將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,如沒有氣泡從過濾器中冒出,說明過濾器內部的霉菌菌團已被硝酸破壞,流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥,打開泵,流速調至1.0~3.0mL/min,純水沖洗過濾器1h左右。即可將過濾器清洗干凈。關閉泄壓閥,純甲醇沖洗0.5h即可。
故障4:基線漂移
原因分析:
一般說來,機器剛起動時,基線容易漂移,大概要半個小時的平衡時間,如果你用了緩沖溶液或緩沖鹽,或在低波長下(220nm)平衡時間相對會比較長,但如果在實驗過程中發現基線漂移,則你要考慮下面的原因:①柱溫波動;②流通池被污染或有氣體;③紫外燈能量不足;④流動相污染、變質或由低品質溶劑配成;⑤樣品中有強保留的物質以饅頭峰樣被洗脫出,從而表現出一個逐步升高的基線;⑥檢測器沒有設定在最大吸收波長處;⑦流動相的pH值沒有調節好。
解決方法:
①控制好柱子和流動相的溫度,檢查是否有打開的窗戶或空調對著柱溫箱;②用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池(最好斷開柱子)。如有需要,可以用1N的硝酸(不要用鹽酸);③更換新的紫外燈;④檢查流動相的組成,使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑;⑤使用保護柱,如有必要,在分析過程中,定期用強溶劑沖洗柱子;⑥將波長調整至最大吸收波長處;⑦加適量的酸或堿調至最佳pH值。